Kariotipas yra visų chromosomų, esančių kiekvienos jas turinčios somatinės ląstelės branduolyje, rinkinys, turintis kiekvienai rūšiai būdingą skaičių ir struktūrą. Kariotipo testas yra citogenetinio tyrimo tipas, kuriuo galima aptikti chromosomų skaičiaus (chromosomų skaičių aberacijos) ir struktūros anomalijas (chromosomų struktūrines aberacijas).

Kariotipasturi visą būdingą chromosomų rinkinį. Chromosomos yra dariniai, sudaryti iš DNR ir b altymų, kiekvienoje žmogaus kūno ląstelėje su branduoliu yra 46 chromosomos, įskaitant 22 poras autosomų, ir 1 pora heterosomų, t. y. lytį lemiančių chromosomų.

Kariotipo testas yra citogenetinis tyrimas, leidžiantis aptikti chromosomų skaičiaus (chromosomų skaičių aberacijos) ir struktūros anomalijas (chromosomų struktūrines aberacijas).

Žinoti savo kariotipą ypač svarbu žmonėms, kurie ilgai ir nesėkmingai bando susilaukti vaikų (šiuo atveju tai turėtų daryti abu partneriai), moterims, daug kartų patyrusioms persileidimus arba pagimdžiusioms negyvą vaiką ir žmones, sergančius genetiškai chromosomų aberacijų sukeltomis ligomis, siekiant patvirtinti diagnozę, padarytą remiantis fenotipiniais požymiais.

Turinys:

  1. Teisingas kariotipas
  2. Kariotipas: bandymo tikslas
  3. Kariotipo nustatymo ir tyrimo indikacijos
  4. Kariotipas: tyrimo medžiaga
  5. Kaip atliekamas kariotipo testas
  6. Kariotipo rezultatų pristatymas
  7. Kariotipas: testo laikas ir kaina

Teisingas kariotipas

Normalus žmogaus kariotipas susideda iš 46 chromosomų, iš kurių 23 yra paveldimos iš motinos (tai yra moteriškos lytinės ląstelės branduolio – kiaušinėlio ląstelės) ir 23 iš tėvo (yra vyriškos lytinės ląstelės ląstelėje). branduolys – sperma).

Tarp chromosomų rinkinio yra 22 poros autosomų (atsakingų už visų požymių, išskyrus susijusius su lytimi, paveldėjimą ir perdavimą) ir 1 pora heterosomų (atsakingų už su lytimi susijusių požymių paveldėjimą).

Kariotipas apibūdinamas skaičiais, kurie parodo bendrą chromosomų skaičių ląstelėjesomatinės ir didžiosios raidės X ir Y, kurios žymi lyties chromosomas.

Normalus moteriškas kariotipas apibūdinamas kaip 46, XX (taigi jį sudaro 46 chromosomos, iš kurių 2 X chromosomos yra lytį lemiančios chromosomos), o normalus vyriškas kariotipas apibūdinamas kaip 46, XY (panašiai jis susideda iš 46 chromosomos, o lytį lemia dvi heterosomos, X ir Y).

Kariotipas: citogenetinio tyrimo tikslas

Atliekamas citogenetinis tyrimas ir kariotipų nustatymas, siekiant patikrinti, ar teisingas paciento chromosomų skaičius ir struktūra. Chromosomų skaičiaus anomalijos vadinamos chromosomų aberacijomis, tarp kurių išskiriamos šios:

  • skaičių chromosomų aberacijos

Normalios morfologijos chromosomų skaičiaus sutrikimai dažniausiai atsiranda dėl nenormalaus ląstelių dalijimosi. Jis išsiskiria:

  • Poliploidinės (euploidinės) ląstelės, kurioms būdingas padaugintas haploidinių chromosomų skaičius (1n=23 chromosomos), būdingas lytinėms ląstelėms, pvz., triploidinės ląstelės (3n=69 chromosomos; kariotipas 69, XXY), tetraploidas (4n)=92 chromosomos; 92 kariotipas, XXXY). Tokie nukrypimai nėra dažni, o žmonėms jie paprastai būna mirtini
  • Aneuploidinės ląstelės, pasižyminčios padidėjusiu arba sumažėjusiu teisingos struktūros pavienių chromosomų skaičiumi. Tokios aberacijos gali paveikti ir autosomas, ir lytį lemiančias chromosomas. Ligos sindromų, kuriuos sukelia nenormalus chromosomų skaičius ląstelėse, pavyzdžiai: - monosomija - Turnerio sindromas 45, X0 (trūksta vienos lytinės chromosomos) - trisomija - Dauno sindromas 47, XX, +21 arba 47, XY, +21 (papildomas). chromosoma poroje 21)
  • Struktūrinės chromosomų aberacijos

Tai chromosomų struktūros sutrikimai, kurių skaičius somatinėje ląstelėje yra teisingas. Dažniausios yra:

  • ištrynimas (chromosomos rankos fragmento praradimas)
  • dubliavimas (konkretaus chromosomos rankos fragmento dubliavimas)
  • įterpimas (papildomo kitos chromosomos fragmento įterpimas į trumpąją arba ilgąją chromosomos ranką)
  • inversija (180 laipsnių chromosomos rankos dalies)
  • translokacija (chromosomos rankos dalies perkėlimas į kitą chromosomą)
  • žiedo chromosomos (susidaro dėl vienos ar kelių chromosomų lūžusių galų plyšimo ir pakartotinio sujungimo)

Kariotipo nustatymo ir tyrimo indikacijos

Citogenetiniai tyrimai ir kariotipų nustatymas atliekami tiek suaugusiems, tiek bandančioms poromspalikuonių, nėščių moterų ir vaikų. Yra daug indikacijų tokiai diagnostikai, ypač:

  • Reprodukcinis nepakankamumas

- poros nevaisingumas (apibrėžiamas kaip nėštumo nebuvimas nepaisant reguliarių lytinių santykių 3–4 kartus per savaitę ne trumpiau kaip 1 metus, nenaudojant jokios kontracepcijos priemonės) - pasikartojantys persileidimai ir sunkumai nėštumo palaikymas - negyvas gimimas - gimęs negyvas vaikas, sergantis genetiškai nustatyta liga, susijusia su chromosomų skaičiaus ar struktūros anomalijų atsiradimu - partnerių, norinčių apvaisinti in vitro, kariotipo tyrimas

  • Genetinė prenatalinė diagnozė nurodoma
    • atveju

- pažengęs motinos amžius (moterys nuo 35 metų) nėštumo metu - vaiko ar brolių ir seserų tėvų chromosomų skaičiaus ar struktūros anomalijos - nenormalūs prenatalinių tyrimų, pagrįstų neinvaziniais vaisiaus metodais, rezultatai vaizdavimas ultragarsu, kuris gali rodyti padidėjusį vaisiaus chromosomų aberacijų riziką (padidėjęs kaklo skaidrumas, nenormalus nosies kaulo vystymasis)

  • Chromosomų aberacijų sukeltų ligų diagnostika

- pacientas turi fenotipinių požymių, rodančių, kad yra specifinis chromosomos sindromas arba dismorfiniai požymiai, patvirtinantys diagnozę - ligų, sukeltų chromosomų aberacijų, buvimas artimiausioje šeimoje

  • Lyties diferenciacijos sutrikimas

- nenormali išorinių lytinių organų struktūra, dėl kurios neįmanoma aiškiai nustatyti naujagimio lyties - nėra lytinio brendimo požymių

Kariotipas: tyrimo medžiaga

Bandomoji medžiaga paprastai yra:

  • Periferinių venų limfocitai
  • Amniocitai arba išsisluoksniavusios vaisiaus ląstelės, randamos nėščios moters vaisiaus vandenyse. Jų tyrimas leidžia nustatyti vaisiaus kariotipą. Vaisiaus vandenų surinkimą (amniocentezę, amniocentezę) atlieka specializuotuose centruose specialiai apmokytas ginekologas, prižiūrimas ultragarso aparatūra. Tai reiškia, kad per motinos pilvo sieną į amniono ertmę įkišama pradūrimo adata ir surenkama 15-20 ml vaisiaus vandenų. Tai invazinis testas su daugybe komplikacijų, įskaitant nėštumo praradimo, dėmių atsiradimo iš lytinių takų, vaisiaus vandenų nutekėjimo, taip pat intrauterinės infekcijos, intrauterinės mirties ar dūrimos adatos sužalojimo riziką. Jie gali būti atliekami nuo 15 iki 20 nėštumo savaičių.
  • langeliaichoriono gaurelių mėginių ėmimas
  • Choriono gaurelių mėginiai imami nuo 9 iki 12 nėštumo savaitės. Tai invazinis tyrimas su daugybe komplikacijų, panašus į amniocentezės tyrimą.
  • Kodrocentezės metu surinkti vaisiaus kraujo kūneliai
  • Kordocentezė, t.y. virkštelės pradūrimas punkcijos adata griežtai kontroliuojant ultragarsu. Jis atliekamas po 16 nėštumo savaitės, siekiant paimti vaisiaus kraują tyrimui. Tai invazinis tyrimas, atliekamas retai ir yra susijęs su daugelio komplikacijų, panašių į amniocentezės ir choriono gaurelių mėginių ėmimą, galimybe.
  • Fibroblastai, gauti naudojant audinių kultūrą
  • Ląstelės, gautos iš vėžinių navikų

Kaip atliekamas kariotipo testas

Visą chromosomų rinkinį galima išbandyti ištyrus bet kurią kūno ląstelę su branduoliais, tačiau dažniausiai naudojami periferinio kraujo limfocitai.

Nedidelis paciento veninio periferinio kraujo mėginys paimamas kaip standartinis pagrindiniam kraujo tyrimui, pavyzdžiui, pilnam kraujo skaičiui. Išankstinis paciento paruošimas tyrimui nereikalingas, jį galima atlikti bet kuriuo paros metu, pacientui nebūtina būti tuščiu skrandžiu

Norint atlikti citogenetinį tyrimą, būtina iš kraujo mėginio gauti limfocitus, slopintus atitinkamoje ląstelių dalijimosi (mitozės) fazėje – metafazėje. Šiuo tikslu ląstelės kultivuojamos in vitro sąlygomis. Naudojant ląstelių dalijimosi stimuliatorius, jos skatinamos daugintis.

Kai ląstelės pasiekia mitozės metafazės stadiją, įvedama speciali medžiaga, kuri slopina dauginimosi procesą pasirinktoje mitozės stadijoje. Metafazės stadijoje chromosomos yra geriausiai išsivysčiusios ir lengviausias būdas jas detaliai išanalizuoti. Kitas kariotipo tyrimo žingsnis yra chromosomų dažymas, siekiant gauti būdingą kiekvienos chromosomos juostelių raštą.

Šiuo pagrindu analizuojantis asmuo gali atpažinti atitinkamas chromosomas ir suskirstyti jas į homologines poras. Chromosomų skaičiaus ir struktūros analizė yra įmanoma naudojant specializuotą įrangą, tikslų šviesos mikroskopą ir kompiuterinę programinę įrangą.

Kariotipo rezultatų pristatymas

Gautos ir nudažytos chromosomos turi būti atpažintos ir suskirstytos į atitinkamas homologines chromosomų poras, pažymėtas skaičiais nuo 1 iki 22. Jas identifikuoti galima dėl kiekvienos poros juostų išdėstymo, būdingo kiekvienai chromosomos. Heterosomos arba lytinės chromosomos yra pažymėtos X ir Y raidėmis.

Grafinis 22 porų chromosomų ir 1 poros autosomų pasiskirstymas vadinamas kariograma. Norint tai atlikti, būtina padaryti specialiai nudažytų chromosomų, sulaikytų mitozinės metafazės stadijoje, mikrofotografiją. Gautos chromosomos išpjaunamos iš nuotraukų ir suskirstytos į homologines poras pagal jų dydį, centromerų padėtį ir juostelių raštus

Kariotipas: testo laikas ir kaina

Citogenetinis tyrimas ir kariotipo sukūrimas paprastai užtrunka 2–4 ​​savaites, nes reikia sukurti tiriamųjų ląstelių kultūrą in vitro ir sustabdyti ląstelių dalijimąsi atitinkamu etapu.

Paciento kariotipas gali būti pažymėtas tiek privačiai citogenetikos laboratorijoje, tiek kompensuojamas Nacionalinės ligonių kasos.

Privačiomis sąlygomis atlikto tyrimo kaina svyruoja apie 500 PLN, ji gali šiek tiek skirtis priklausomai nuo laboratorijos, kurioje jis atliekamas.

Kategorija:

Nėščiųjų tyrimai